3B Scientific Experiment Set - On the Trail of Flavour Enhancers Brand new and topical-versatile in classroom situations - Manual (Page 20)

®
20
Español
V. Experimentación
Preparación de la prueba
Pesar 3 g de una muestra (finamente pulverizada en el mortero) en un frasco de Erlenmeyer y mezclar
con 5 ml de solución extractiva. Si no hay ningún mortero lo suficientemente grande, la muestra también
puede procesarse porción por porción. Fíltrese el extracto a través de un filtro del papel. El filtrado se usará
para la cromatografía de capa delgada.
Si se quiere llevar a cabo la cromatografía de capa delgada después, puede guardarse el filtrado congelado
a -18 °C durante varias semanas.
Cromatografía de capa delgada
Nota: Por favor utilizar las pinzas y tocar solo el borde del papel cromatográfico para moverlo o trans-
portarlo. Por favor usar guantes y no dejar huellas digitales en el papel. La regla a utilizar debe estar com-
pletamente limpia!
Primero, trace una línea horizontal delgada de aproximadamente 1,5 centímetros con un lápiz en el borde
inferior del papel cromatográfico (vea Fig. 1). Ésta es la línea de arranque para las muestras y los respecti-
vos estándares de ácido glutámico. Debajo de esta línea de arranque, a una distancia de 8 mm, serán enu-
merados los trazos 1, 2, 3, etc. de izquierda a derecha. Una parte de los anteriormente llamados estándares
de ácido glutámico (1 mg/ml) se diluirá 1:3 y 1:5 con H
2
O, para que estén disponibles 3 estándares con
concentraciones de 1 mg/ml, 0.33 mg/ml y 0.2 mg/ml y sean analizados. Llene la cámara cromatográfica
con la mezcla de solventes aproximadamente 7 mm y cierre con la tapa. Para la saturación de la cámara
debe incubarse por lo menos 15 min.
Las muestras como también los estándares serán aplicados por medio de los tubos capilares (10µl) y
estarán igualmente distanciados desde la línea de arranque (sobre los números). Para cada muestra y cada
estándar se usará un nuevo tubo capilar.
Para la aplicación, ponga el papel cromatográfico horizontalmente en la mesa. Después de la aplicación,
abra la cámara cromatográfica y ponga el papel cromatográfico cargado con las muestras y estándares con
la línea de arranque apuntando hacia abajo y ciérrelo de nuevo con la tapa.
Ahora la mezcla de solventes debe subir hacia arriba en el papel cromatográfico. Cuando el solvente está
por encima aproximadamente 7 cm (medido desde la línea de arranque), quite el papel de la cámara y
póngalo en la mesa a secar. El proceso de secado puede acelerarse cuidadosamente con un secador de pelo
a poca potencia o usando un horno a baja temperatura. También se puede secar a temperatura ambiente.
Ahora es posible realizar la coloración o también es posible guardar el cromatograma en el frigorífico pro-
tegido de la luz durante algunos días antes de que ocurra la coloración.
Coloración de aminoácidos
Nota: ¡El recipiente tiene que estar completamente limpio sin huellas digitales, etc., ya que cualquier con-
taminación proteínica se colorearía también!
Vierta un poco del colorante en un recipiente de vidrio o plástico adecuado. Luego coloque el papel cro-
matográfico muy brevemente (1 seg.) en el colorante y déjelo secar en el aire o en un horno a aproxima-
damente 105°C. Después de esto estará listo para el análisis.
El cromatograma con colorante puede guardarse a temperatura ambiente y en un cuarto oscuro. Para
pegarlo en el cuaderno preferiblemente con Tesafilm.
Rastreando potenciadores del sabor