Hoefer IEF100 - Manual (Page 60)

• p54
Tira IPG Solución de Rehidratación
2A. Rehidratación urea Solución de archivo
Prepara 50 ml
8 M urea, CHAPS 2%, 0,002% de azul de bromofenol
Concentración final Cantidad
La urea (FW 60.06) 8 M 24 g
CHAPS 2% (w/v) 1,0 g
Azul de bromofenol 0,002% 1 mg
El agua desionizada a 50 ml
Almacenar en alícuotas de 3 ml a -20 °C o menos. 3 ml es suficiente para
rehidratar seis tiras de 24 cm IPG.
Justo antes de su uso para la rehidratación tira IPG:
• Añadir 0.5-2.0% (v/v) anfolitos portadores (SERVALYTS).
• Agregar la TDT de 9 mg por 3 ml de alícuota de la solución de
rehidratación almacén 20 mM de DTT.
• Muestra La proteína también se puede añadir a la de 3 ml de solución
de rehidratación.
2B. Rehidratación tiourea solución de archivo
Prepara 50 ml
7 M urea, tiourea 2 M, CHAPS 2%, 0,002% azul de bromofenol
Concentración final Cantidad
La urea (FW 60.06) 7 M 21 g
Tiourea (FW 76.12) 2 M 7,6 g
CHAPS 2% (w/v) 1,0 g
Azul de bromofenol 0,002% 1 mg
El agua desionizada a 50 ml
Almacenar en alícuotas de 3 ml a -20 °C o menos. 3 ml es suficiente para
rehidratar seis tiras de 24 cm IPG.
Justo antes de su uso para la rehidratación tira IPG:
• Añadir 0.5-2.0% (v/v) anfolitos portadores (SERVALYTS).
• Agregar la TDT de 9 mg por 3 ml de alícuota de la solución de
rehidratación almacén 20 mM de DTT.
• Muestra La proteína también se puede añadir a la de 3 ml de solución
de rehidratación.