Hoefer IEF100 - Manual (Page 28)

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Nota: Las soluciones de rehidratación
típicamente contienen altas
concentraciones de urea que tienden
a cristalizar a temperaturas más bajas.
Por esta razón, la rehidratación no
debe hacerse en cámaras frigoríficas
o en ambientes más fríos de manera
significativa a los 20 °C.
Nota: Las tiras deslizantes en el
tampón de rehidratación se moje
toda la longitud de la tira, y ayuda a
evitar que se pegue. Tiras colocados
directamente contra la parte inferior
de plástico de la bandeja de
rehidratación puede adherirse, y no
rehidratar correctamente.
La rehidratación de las tiras de IPG
Un breve análisis de los ingredientes de rehidratación y su función
está incluida en el Apéndice B, junto con algunas de las soluciones
recomendadas. Los reactivos se pueden personalizar para muestras
específicas.
El volumen de la solución depende de la longitud de la tira para ser
utilizado. Hoefer recomienda seguir las recomendaciones del fabri-
cante de la tira IPG.
Una tabla de volúmenes típicos se incluye a continuación.
Longitud de Volumen por
la tira (cm) la Franja de (μl)
7 130
18 340
24 450
Aplicar una solución de rehidratación en un canal de la bandeja de
rehidratación de tamaño apropiado en una línea ligeramente más
corta en longitud que la tira para ser rehidratados.
Muchos fabricantes tira IPG de cubrir las tiras con una cubierta
protectora. Si está presente, retire la capa protectora.
Colocar la tira, el gel hacia abajo, sobre el líquido en el canal. Deslice
suavemente la tira hacia atrás y adelante para humedecer toda la
longitud del gel IPG con solución de rehidratación. A veces, levantar y
bajar la tira IPG puede ayudar a conseguir el contacto adecuado de la
solución sobre toda la longitud de la tira de gel de IPG.
Cubra las tiras con aceite mineral, el número de Hoefer fin GR138-1.
Permitir la rehidratación de un mínimo de 8 horas. Mejor rehidrata-
ción se produce si permitiendo tiras para rehidratar durante la noche.
Nota: El uso más que los volúmenes
recomendados pueden contribuir a la
pérdida de la proteína o los resultados
borrosas IEF.
Nota: IEF100 es un lugar conveniente
para rehidratar las tiras. La placa fría se
mantenga una temperatura constante, y
la cubierta ayudará a proteger las tiras
IPG de polvo.