Hoefer SE640 - Manual (Page 43)

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Recetas de gel
Las recetas de gel Laemmli son para 30 ml de
una solución única concentración (suficiente
para dos de 1,5 mm, 18 × 8 cm geles). Tabula-
dos son los ingredientes y los volúmenes para los
geles de poros relativamente grandes (7.5-10%
Gama T), así como geles pequeños poros (12.5-
15% Gama T). Un gel de 4% de apilamiento es
común. La receta gradiente lineal es de 100 ml
de solución. El volumen total necesaria depende
del número de fundición geles y el espesor de
gel; ajuste si es necesario. Todos los geles se
reticulado con 2,6% de C.
Laemmli en gel
(por 30 ml de solución gel de resolución, 5 ml de solución de gel de apilamiento)
Gel de
Separación de gel apilamiento
7,5% 10% 12,5% 15% 4%
Acrilamida acciones (Soln, #1) 7,5 ml 10,0 ml 12,5 ml 15,0 ml 0,67 ml
1,5 M TrisCl, pH 8,8 (Soln, #2) 7,5 ml 7,5 ml 7,5 ml 7,5 ml —
0,5 M TrisCl, pH 6,8 (Soln, #3) — — — — 1,25 ml
10% SDS (Solución #4) 0,3 ml 0,3 ml 0,3 ml 0,3 ml 0,05 ml
H
2
O desionizada 14,6 ml 12,1 ml 9,6 ml 7,1 ml 3,00 ml
10% APS (Solución #5) 150 µl 150 µl 150 µl 150 µl 25 µl
TEMED 10 µl 10 µl 10 µl 10 µl 2,5 µl
Volumen final 30,0 ml 30,0 ml 30,0 ml 30,0 ml 5,0 ml