Hoefer SE640 - Manual (Page 37)

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Resolución de la
banda pobre condiciones de
funcionamiento Comienza electroforesis tan pronto como la muestra se carga
para evitar las especies de bajo peso molecular a partir de
la difusión.
Llevar a cabo la separación en una posición más baja de cor-
riente o tensión para reducir el calentamiento Joule.
reactivo de la calidad Use sólo los reactivos de la más alta calidad.
Pobre de apilamiento Utilice solamente los geles que estaban recién preparado.
Añadir un gel de apilamiento o aumentar la altura del gel de
apilamiento. Preparar la superficie Resolviendo-gel por prim-
era vez aclarado con monómero de apilamiento de gel antes
de verter el gel de apilamiento para asegurar la continuidad
entre los geles.
Compruebe los valores de pH de las resolución de apilamien-
to y-gel soluciones. No valorar en retroceso tampones.
Polimerización de gel
incompleta Permitir gel para polimerizar completamente.
preparación de la
muestra Almacenar la muestra en hielo antes de que sea desnatural-
izada.
Dializar o desalar la muestra.
Muestras de calor en tampón de muestra SDS para no más
de 1-2 minutos a 100 °C para mejorar la disociación de las
subunidades. Almacenar en hielo después del calentamiento.
Ajustar el volumen de muestra o de la concentración.
Añadir más mercaptoetanol o ditiotreitol, revisar el trata-
miento de la muestra.
Añadir inhibidores de proteasa tales como PMSF si es nec-
esario para evitar la degradación proteolítica de la muestra.
Aumentar glicerol o sacarosa para aumentar la densidad de
la muestra.
Almacene las muestras que se congeló en alícuotas para
evitar repetidas congelación-descongelación. Almacenar a
-40 a -80 °C.
problema posible causa remedio