Hoefer SE640 - Manual (Page 41)

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6. 0,375 M TrisCl, SDS al 0,1%, pH 8,8
(Gel de resolución de superposición, 100 ml)
1,5 M de Tris-Cl, pH 8,8 (Soln. #2)
0.375 M 25,0 ml
10% de SDS (Soln. #4) 3,5 mM 1,0 mL
H
2
O desionizada a 100,0ml
-O-
El agua saturada de n-butanol
Agitar n-butanol y desionizada H
2
O en un embudo de separa-
ción. Retire la acuosa (inferior) de fase. Repita este proced-
imiento varias veces. Utilice la fase superior.
-O-
Si una superposición interfiere con el protocolo preferido,
aislar el gel a partir del oxígeno atmosférico mediante la
colocación de un peine en blanco o resolver formador de gel
en el gel.
7. Ejemplo 2X tampón tratamiento
(0,125 M TrisCl, 4% de SDS, 20% de glicerol,
2% de 2-mercaptoetanol, pH 6,8, 10 ml)
0,5 M de Tris-Cl, pH 6,8 (Soln. #3) 0,125 M 2,5 ml
10% de SDS, 0,35 M (Soln. #4)
0,14 M 4,0 ml
Glicerol (FW 92.09) 20% v/v 2,0 ml
2-mercaptoetanol (FW 78.13) 2% v/v 0,2 ml
[-O-ditiotreitol (DTT) 0,2 mM 0,31 g]
(PF 154,2)
Azul de bromofenol (FW 691,9)
0,03 mM 0,2 mg
H
2
O desionizada a 10,0 ml
Dividir en partes alícuotas de 1,0 ml y se almacena a -40 °C
a -80 °C.
-O-
Ejemplo 6X tampón tratamiento
(0,35 M TrisCl, 10% de SDS, 30% de glicerol, 9,3% DTT,
pH 6,8, ~10 ml)
0,5 M de Tris-Cl, pH 6,8 (Soln. #3) 0,35 M
7,0 ml
SDS (PF 288,4) 0,35 M 1,0 g
Glicerol (FW 92.09) 30% v/v 3,0 ml
TDT (PF 154,2) 0,6 M 0,93 g
Azul de bromofenol (PF 691,9) 0,175 mm 1,2 mg
Dividir en partes alícuotas de 1,0 ml y se almacena a -70 °C.