Hoefer SE640 - Manual (Page 35)

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Rayas verticales
de proteínas Las partículas de la
muestra Centrifugar o filtrar la muestra antes de la carga para elimi-
nar las partículas.
La sobrecarga Cargar menos muestra.
Degradación Añadir inhibidor de la proteasa, tales como PMSF.
Inusualmente lento
(o rápido)
de ejecución La fuga de corriente
en torno de gel Compruebe si hay fugas, todas las placas y los separadores
debe estar alineada y libre de grasa y las grietas.
Si se utiliza, la presa de almacenamiento intermedio debe
ser seguro.
Muestra o prepara-
ción de los reactivos Si el pH requerido de una solución que se rebase, no valorar
en retroceso. Descartar y preparar tampón nuevo.
Compruebe recetas, las concentraciones de gel, y la dilución
de amortiguación. (Por ejemplo, no utilice Tris-HCl en vez de
Tris para el tampón de Laemmli tanque.)
Disminuir la concentración de sal de las muestras.
Reactivo de la
calidad Deshágase de las soluciones de acrilamida mayores y utilizar
sólo acciones de la más alta calidad. Use sólo la urea recién
desionizada.
Valores de voltaje o
corriente Para aumentar o disminuir la velocidad de migración, ajustar
el. Voltaje o corriente en un 25-50%
Las bandas están
sesgados o distor-
sionados Preparación del gel
y la polimerización
incompleta Desgasificar el apilamiento-gel de la solución y evitar burbu-
jas de aire bajo los dientes del peine.
Interfaz de apila-
miento irregular entre
en funcionamiento
geles Superponer el gel de funcionamiento con agua saturada con
butanol antes de la polimerización comienza, para evitar la
formación de un gel de superficie desigual.
Preparación de la
muestra Dializar o desalar la muestra.
problema posible causa remedio