Hoefer SE640 - Manual (Page 29)

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Tiempo
Una ejecución es completa cuando el colorante de
rastreo alcanza la parte inferior del gel. 1,5 mm de
espesor Laemmli en gel de SDS, que funcionaba a
25 mA/gel sin refrigeración, por lo general requiere de
2.5 horas.
Electroforesis parámetros para ADN /
acrilamida geles
Geles de ADN normalmente son operados a un ajuste
de voltaje constante, y dado que los sistemas de
amortiguación son continuas, ambas lecturas de
corriente y tensión se mantienen constantes a lo
largo de la carrera. Condiciones de funcionamiento se
expresa en unidades de V/cm. Publicado condiciones
de funcionamiento varían ampliamente, pero
tensiones en el rango de 1 a 3 V/cm son comunes
para carreras durante la noche.
Registre cada carrera
Mantenga un registro de la configuración de corriente
o voltaje, el número y el grosor de los geles,
sistema de amortiguación, y las lecturas inicial y
final de corriente o voltaje para cada carrera para
que los resultados pueden ser comparados. Los
resultados inconsistentes para el mismo sistema
y la configuración de indicar posibles problemas
como la filtración de las concentraciones actuales de
búfer incorrecto, las altas concentraciones de sal o
productos químicos de calidad inconsistente.
Comprobar el progreso de la banda después de
5 minutos, y de nuevo después de una hora,
manteniendo un ojo en la tasa de migración del
colorante de seguimiento. La carrera se completa
cuando el colorante de rastreo alcanza la parte
inferior del gel. Ver el nivel de amortiguación y, si es
necesario, reponer según sea necesario para mantener
el electrodo superior sumergido. (Un pequeño
volumen de tampón puede filtrarse pasado una placa
de muescas o junta, o tampón puede pasar a través
del gel.)
¡Atención! Después de monitoreo
inicial, no deje la unidad sin
usar por más de 1 hora antes
de comprobar el progreso
de las bandas y el nivel de
amortiguación.