Hoefer SE640 - Manual (Page 19)

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Geles de acrilamida
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Preparar la solución de monómero y verter el gel.
Preparar la cantidad necesaria de solución de
monómero. Purgar y añadir el iniciador y el cataliza-
dor justo antes de verter el gel. Pipetear la solución
en una esquina del sándwich, teniendo cuidado de
no introducir burbujas de aire. Véase más abajo para
el nivel de la solución apropiada de acuerdo con la
aplicación.
No gel de apilamiento (sistema continuo).
Solución de llenado hasta justo debajo de la parte
superior del borde de la placa superior. Si las burbu-
jas se encuentran atrapados, retire con una pipeta o
una jeringa. Introducir un peine (con un ligero ángulo)
en cada sándwich, teniendo cuidado de no atrapar
burbujas de aire debajo de los dientes.
Club sándwich.
Pipetear la solución en ambos emparedados, llenando
cada uno al mismo nivel por debajo del borde con
muescas.
Gel de apilamiento.
Completa solución a 3-4 cm por debajo de la parte
superior de la placa de vidrio. Esta altura permite 1 cm
de gel de apilamiento por debajo de los pozos. Verter el
gel y aplicar una plantilla (ver paso 2). Después el gel
se establece, preparar el gel de apilamiento, como se
describe a continuación.
La 2-D electroforesis (sistema de la proteína discontinua).
Completa solución de monómero de aproximadamente
1 cm por debajo de la parte superior de la placa de
cristal para permitir 4 a 5 mm para la tira IPG o gel
de tubo y un sello de agarosa. (Un gel de apilamiento
se requieren espacio adicional). Selle la tira IPG o gel
tubo en su lugar con la agarosa disuelta en la gestión
de memoria intermedia. Tenga cuidado de no atrapar
burbujas de aire entre los geles de primera y segunda
dimensión.