La electroforesis de amortiguación, Coomassie mancha solución, Destain solución i – Hoefer SE400 User Manual
Page 41: Destain solución ii, Solución de reticulación, Dtt (dithiothreitol) solution
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8. La electroforesis de amortiguación
(0,025 M Tris, 0,192 M glicerol, 0,1% SDS, pH 8,3,
5,0 liters)
Tris (FW 121,1)
0,025 M
15,1 g
Glicerol (FW 75,07)
0,192 M
72,1 g
SDS (FW 288,4)
3,5 mm
5,0 g
H
2
O desionizada
a 5,0 liters
El pH de este tampón es de aproximadamente 8,3. No
ajustar el pH. Hasta 20 litros se pueden preparar y almacenar
durante hasta 2 meses.
9. Coomassie mancha solución
(0,025% Azul de Coomassie R-250, 40% El metanol,
7% El ácido acético, 2 liters)
Azul de Coomassie R-250 (FW 826) 0,3 mm
0,5 g
El metanol
(Revuelva hasta que se disuelva)
40% v/v
800,0 ml
El ácido acético
7% v/v
140,0 ml
H
2
O desionizada
a 2,0 liters
10. Destain solución I
(40% El metanol, 7% El ácido acético, 1 liter)
El metanol
40% v/v
400,0 ml
El ácido acético
7% v/v
70,0 ml
H
2
O desionizada
a 1,0 liter
11. Destain solución II
(7% El ácido acético, 5% El metanol)
El metanol
5% v/v
50,0 ml
El ácido acético
7% v/v
70,0 ml
H
2
O desionizada
a 1,0 liter
12. Solución de reticulación
(10% glutaraldehído)
20 ml de caldo de glutaraldehído al 50%
El agua destilada hasta 100 ml.
13. DTT (dithiothreitol) solution
(5 µg/ml)
5 mg DTT
Lleve a 1 L con ddH
2
O.
¡Atención! Glutaraldehído sólo
debe ser manejado en una
campana extractora.