Hoefer SE400 - Manual (Page 28)

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2.5 La resolución de la muestra
Parámetros de electroforesis para geles de
poliacrilamida discontinuos
Los geles se pueden ejecutar en contextos de
tensión constante de corrientes o constantes. Un
ajuste de corriente constante se utiliza tradicio-
nalmente con un sistema de tampón discontinuo
de modo que la velocidad de migración electro-
forética permanece inalterada a lo largo de la
carrera. Bajo las condiciones actuales constantes,
la tensión aumenta a medida que avanza plazo.
Un valor más bajo en curso se recomienda
para una mayor resolución. El nivel óptimo de
corriente se debe determinar empíricamente; los
principales factores que deben equilibrarse son la
concentración de gel y la velocidad de migración,
y el calentamiento Joule y la distorsión resultante
banda. Tabla 3 se enumeran a partir del punto
directrices y ajustes para el espesor de gel, el
número de geles, y tasa de migración.
Tabla 3. Sistema tampón de Laemmli partida
directrices punto
Gel de espesor* 1,5 mm
Actual por gel † 25 mA corriente constante
A partir de tensión 80–90 V
Gel de longitud (cm) modelo voltaje final (V)
16 SE400 200–250
24 SE410 275–325
* Geles más gruesas o más delgada requieren proporcional-
mente más o menos corriente. Por ejemplo, un gel de
0,75 mm, que es la mitad del grosor de un gel de 1,5 mm,
requiere la mitad como mucho de corriente, o mA 12,5.
† El actual debe ser multiplicado por el número de geles. Por
ejemplo, si un 1 mm de 2-gel de sándwich se instala, la
corriente doble que se requiere que para un gel mm solo 1 a
la misma tensión.
Nota: La sección transversal
(y el requisito de corriente) se
determina por el espesor de gel.
El tiempo de ejecución está
determinada por la longitud de
la placa.