Hoefer SE400 - Manual (Page 37)

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Muestra teñida recoge:
Cerca de la
parte delantera
tampón Gel de concentración Las moléculas no están lo suficientemente restringido por el
tamaño de poro de gel de resolución de: aumentar la% T.
Degradación Las proteínas pueden ser degradadas por proteasas
endógenas: utilizar inhibidores de la proteasa durante la
etapa de aislamiento.
Cerca de la
parte superior
del gel cuando
el frente tampón
ha alcanzado la
parte inferior Gel de concentración El tamaño de los poros del gel es demasiado pequeño:
disminuir la T% de la resolución (o encima) de gel.
Precipitación La proteína ha precipitado. Se calienta la muestra a una
temperatura más baja (70 °C o menos) durante 1-2 min.
En la parte
superior e
inferior del gel Gel de concentración El rango de peso molecular de la muestra requiere un
gradiente de concentración de acrilamida para resolver la
gama completa de tamaños de las proteínas.
problema posible causa remedio
Seguimiento de
tinte no afilar en
una zona concen-
trada en el gel de
apilamiento Pobre de
apilamiento Vierta un gel más alto de apilamiento. (Para obtener los
mejores resultados, permita una altura de apilamiento de gel
de 2,5 veces la altura de la muestra en el pozo.)
Reactivo de
la calidad Deshágase de las soluciones de acrilamida obsoletas y usar
sólo el grado más alto de la acrilamida.
Preparación de la
muestra En la preparación de muestras, evitar el uso de soluciones
con altas concentraciones de sal.