Hoefer SE300 miniVE - Manual (Page 25)

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problem lösung
Stained Probe sammelt: In der Nähe der Puffer vor
• Protein ist nicht ausreichend durch die Trenngel einge-
schränkt, erhöhen Sie den% T.
Im oberen Bereich des Gels, wenn der Puffer vor hat die
Talsohle erreicht
• Das Gel Poren zu klein ist. Verringern Sie die T% des
Trenngel.
• Das Protein wurde ausgefällt. Erhitzen Sie die Probe bei
einer niedrigeren Temperatur (70 °C oder weniger) für
1-2 Minuten.
Schlechte Band-Auflösung • Verwenden Sie nur die höchste Qualität Reagenzien.
• Führen Sie den Abstand zu einem niedrigeren Strom-oder
Spannungs-Einstellung.
• Dialysieren oder Entsalzung der Probe.
• Reduzieren Sie die Probenvolumen oder Konzentration.
• Verwenden Sie nur frisch deionisiert Harnstoff.
• Erhöhen Dissoziation von Untereinheiten durch Erhitzen
Probe in SDS-Probenpuffer 1-2 Minuten bei 100 °C
• Fügen Sie weitere Mercaptoethanol oder Dithiothreitol;
überprüfen Probe Behandlung.
• Verwenden Sie nur Gele, die vor kurzem hergestellt wurden.
• Prüfen pH-Werten von der Trenn-und Stacking-Gel-Lösun-
gen. Nicht zurück-titriert Puffer.
Probenvorbereitung
• Hitze Proben für nicht mehr als 1-2 Minuten bei 100 °C.
Bewahren Sie nach dem Erhitzen auf Eis.
• Bewahren Probe auf Eis, bevor es denaturiert ist.
• Add-Protease-Inhibitoren gegebenenfalls proteolytischen
Abbau der Probe zu verhindern.
• Shop Proben in Aliquots eingefroren werden, um wieder-
holtes Einfrieren und Auftauen zu verhindern. (Lagerung bei
-40 °C bis -80 °C)
• Gießen Sie ein größer Sammelgel. (Für beste Ergebnisse
ermöglichen eine Sammelgel Höhe des 2,5-fachen der Höhe
der Probe in den Brunnen.)
• Entsorgen veralteter Acrylamid-Lösungen und verwenden Sie
nur den höchsten Grad von Acrylamid.
• Bei der Herstellung von Proben, vermeiden den Einsatz
von Lösungen mit einem hohen Natrium-oder Kalium-
Konzentration.
Bromphenolblau nicht in einer
konzentrierten Zone schärfen dem
Stacking-Gel