Hoefer SE300 miniVE - Manual (Page 17)

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Warnung! Acrylamid ist ein
Nervengift. Tragen Sie immer
Handschuhe und beachten Sie
alle Labor-Sicherheitsverfahren.
Hinweis: Etwa 10 ml der
Monomerlösung ist erforderlich,
um ein 1 mm dickes Gel
gegossen.
Ein 1 cm Sammelgel unterhalb der Vertiefungen
Füllen Sie bis 3 cm unterhalb der Oberkante des
rechteckigen Glasplatte. Überlagern jedes Gel
mit einer dünnen Schicht von Wasser-gesättigtem
n-Butanol, Wasser oder verdünnten Gel-Puffer zu
verhindern, daß die Monomerlösung zu Sauer-
stoff. Verwenden Sie ein Glas Spritze mit einer
22-Gauge-Nadel auf 100 µl der Overlay-Lösung
langsam gelten für eine Seite des Sandwich, in
der Nähe der Abstandshalter montiert. Lassen
Sie die Lösung über die Oberfläche allein fließen.
Nach der Polymerisation

Lassen Sie mindestens 1 Stunde für das Gel zu
polymerisieren.

Wenn ein Kamm ist vorhanden, entfernen Sie
diese durch vorsichtiges Ziehen auf der Wabe,
während es sanft schaukelnd hin und her, um
das Vakuum zu brechen. Spülen Sie die Wells
mit Elektrophoresepuffer, jede unpolymerisierten
Acrylamid zu entfernen.
Wenn ein Overlay angewendet wurde, spülen Sie den
Sandwich mehrmals mit doppelt destilliertem Wasser
zu entfernen. Kehren Sie die Modul zu entwässern.
Um eine nahtlose Kontakt zwischen der Lösung
und Stapeln von Gelen zu gewährleisten, entfernen
Restflüssigkeit durch Abtupfen einer Ecke des Gels
mit einem fusselfreien Tuch.
Gießen Sie die Sammelgel

Bereiten Sie das Sammelgel Monomerlösung.

Entlüften Sammelgel Monomerlösung, fügen
Katalysator und Initiator und dann gießen. Mit einer
Pipette auf die Lösung in einer Ecke der Platte liefern,
wobei darauf geachtet, keine Blasen zu fangen.