Riferimenti, Protocollo – Hoefer HB1000 User Manual
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Protocollo
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Chemiluminescenza rilevamento: HRP-tag, fosfatasi
alcalina (AP) sonde o coniugati per l’anticorpo.
Attrezzatura
• Plastica trasparente aggrapparsi-wrap o deselezion-
are protezione trasparente foglio.
• Hoefer ULTima Pro sistema di imaging con camera
CCD raffreddata.
• Pipetta
Reagenti (chemiluminescenza)
• ECL
™
(o altro) reagente di rilevamento 1
• ECL (o altro se richiesto) reagente di rilevamento 2
• Ibridazione membrana seguente
Procedura
1. Mix volumi uguali di reagenti di rilevazione 1 e 2.
2. Pipettare la miscela sulla superficie della
membrana e lasciare a temperatura ambiente per
1 minuto.
3. Segui le istruzioni di lavaggio fornite dal produttore
del kit. Rimuovere il lavaggio finale e coprire la
membrana in involucro di plastica.
4. Image utilizzando il Prochemiluminescence Hoefer
ULTima sistema di imaging.
Riferimenti
Ross, J (1998). Nucleic Acid Hybridization:
Essential Techniques. John Wiley and Sons, ISBN
0-471-97125-1.
Sambrook, J (2001). Molecular Cloning: A Laboratory
Manual (Third Edition). Cold Spring Harbor Labora-
tory Press, ISBN 0-87969-577-3.
Current Protocols in Molecular Biology (1987). John
Wiley and Sons; ISBN 0-471-50338-X.