Hoefer HB1000 - Manual (Page 28)

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No sondas radiactivas
1. Lavarse las manchas En 2X SSC, 0,1% SDS
durante 3 minutos a temperatura ambiente (repetir
una).
2. Wash filtro en 0.15X SSC, 0,1% SDS durante
15 minutos a 50 °C (repetir una vez).
3. La tienda de blots en 2X SSC a temperatura
ambiente.
Sondas radiactivas
1. Eliminar blot de la botella de hibridación y la
transferencia a Tupperware contenedor.
2. Enjuague brevemente en 50 °C 0,1 X SSC,
0,1% SDS.
3. Quite y deseche la solución de los residuos
radiactivos.
4. Lavar mancha más tres veces en la misma
solución.
5. Después del lavado final, secar la mancha sobre
papel de filtro durante 10 minutos. Este es un
buen momento para pasar rápidamente su mano
radioisótopo lector (contador beta o gamma) sobre
su blot para tener una idea general sobre el tiempo
de exposición que se necesita para la película
X-ray. Blots calientes pueden ser colocados contra
la película durante 20 minutos a 2 horas. De lo
contrario, la exposición puede continuar durante la
noche (8 horas).
6. Cinta de la transferencia a un soporte de cartón.
7. Cubra con una envoltura de plástico para evitar que
las manchas se adhieran a la película X-ray.
8. Coloque el cartón que contiene los blots en la
carpeta de película de rayos-X.
9. En el cuarto oscuro, coloque una hoja de película
de rayos X a través de la mancha (s).
10. Place una pantalla de intensificación en la parte
superior de la película.
11. Cierre el soporte de la película y sujetarlo.
12. Conservar a -70 °C. La baja temperatura reduce
la dispersión de la luz y aumenta la longitud del
tiempo de exposición. Exponer la mancha durante
20 minutos a 24 horas.