Hoefer SUB Series - Manual (Page 26)

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Utilizando las unidades de gel
de electroforesis horizontal
Preparación de geles de agarosa
La cantidad de agarosa necesaria para dar
una necesidades particulares% de gel para ser
calculados, por ejemplo un gel de 0,8% se puede
hacer disolviendo 0,8 gramos de polvo de agarosa
en 100 ml de tampón de funcionamiento. El tipo
de funcionamiento de amortiguación utilizada
debe ser siempre el mismo para el gel que se
utiliza en el tanque tampón. La agarosa necesita
ser completamente disuelto antes de que el gel
puede formarse adecuadamente. Esto puede
lograrse mediante calentamiento con agitación en
un baño de agua o incubadora ajustado a 70 °C o
por calentamiento en un bloque de calentamiento
magnético con una barra de agitación magnética
insertada. El frasco deberá estar siempre cubierto
para evitar la evaporación del buffer y un gel de
mayor concentración resultante. Estos métodos
pueden tener más de 1 hora para que la agarosa
se disuelva completamente. Alternativamente, la
agarosa se puede disolver en aproximadamente 5-10
minutos utilizando un horno de microondas. La
solución de agarosa deben estar cubiertos y el horno
de microondas fijado muy bajo. La agarosa se disuelve
mejor si el horno de microondas es periódicamente
se detuvo y se agitó la solución. Antes de verter, la
solución de agarosa se deben comprobar para no
disueltas cristales de agarosa que pueden afectar a
las características de movilidad de los geles. Si éstos
están presentes, agarosa disolución se debe continuar.
La solución de agarosa se enfrió a 50-60 °C antes
de verter. Si se vierte a una temperatura demasiado
caliente, el gel es más probable una fuga y también el
peine puede llegar a distorsionarse.
Electroforesis en gel de agarosa
ADN Movilidad
Los fragmentos de ADN tan pequeñas como 1 kb o
menos pueden ser separados mediante electroforesis