Manual de instrucciones – Hoefer HE-PLUS System User Manual
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Manual de instrucciones
A. Directrices para la selección tampones
de electroforesis de gel y concentraciones
Los dos buffers más comúnmente utilizados
para electroforesis horizontal de ADN de cadena
doble en geles de agarosa son Tris-acetato-EDTA
(TAE) y Tris-Borato-EDTA (TBE). Mientras que
las potencias de la resolución de estos tampones
son muy similares, la capacidad de amortigua-
miento en relación son muy diferentes, que
confiere distintos atributos de ejecución que se
resumen a continuación:
TAE
Tris-acetato ha sido tradicionalmente el tampón más
comúnmente utilizado. Sin embargo, su capacidad de
amortiguación relativamente bajo se agotará durante
la electroforesis extendida, por lo que la recirculación
de amortiguación necesaria en carreras superiores a
140 mA horas. Las ventajas potenciales del uso de
tampón TAE en tampón TBE incluyen una resolución
superior de ADN superenrollado y la migración de
aproximadamente un 10% más rápido de la doble
cadena de fragmentos de ADN lineales.
TBE
Tris-borato es significativamente mayor capacidad
tamponante y su consumo de corriente relativamente
baja elimina la necesidad de recirculación en todos
menos los recorridos más largos (> 300 mA-hora).
Los sistemas tampón TBE no se recomiendan cuando
los fragmentos se recuperaron del gel después de
electroforesis.