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Sq33 istruzioni per l’uso – Hoefer SQ33 Sequencer User Manual

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3. SQ33 Istruzioni per l’uso

3.1 Preparazione Regent e volumi Gel

Per poliacrilammide riproducibilità e uniforme
reticolazione si consiglia deionizzanti, degasaggio
e filtrazione di soluzioni gel di acrilammide prima
dell’uso. Le soluzioni di acrilammide devono
essere conservati in un luogo fresco e buio come
un frigorifero e ha permesso di raggiungere la
temperatura ambiente prima di versare. Evitare
l’esposizione al calore e alla luce del sole.

Condizioni di polimerizzazione deve essere
regolato per effettuare la polimerizzazione in
circa 5–10 minuti. Testare un piccolo volume
in una fiala prima di versare il gel. Come guida
approssimativa 100 ml di gel di acrilamide
degasato 6% viene impostato in circa 5 minuti
a temperatura ambiente quando miscelato
delicatamente con 450 μl di preparati persolfato
di ammonio al 10% (w/v) più 200 μl TEMED.
Il tempo di presa aumenta di circa 10 minuti, se
il volume TEMED è ridotto a 100 μl e per circa
15 minuti con 75 μl. La quantità di catalizzatori
può essere necessario ridurre in condizioni calde.
Non versare sotto la luce solare diretta.

Il SQ33 Sequencer, utilizzando distanziatori 0,35
mm di spessore, richiede circa 60 ml di soluzione
di acrilamide.

3.2 Gel Versare

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Rimuovere eventuali impronte grasse o acqua sui
bordi delle lastre di vetro strofinando con acetone.
Posare la lastra piana di vetro su una superficie piana
e disporre i distanziali a filo con i bordi della piastra.
Adagiare la piastra dentata vetro sulla parte supe-
riore e bloccare le piastre insieme. Il panino gel è
ora pronto per versare. Fare riferimento alla figura in
figura 1, pagina 6.

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