Hoefer SQ33 Sequencer - Manual (Page 15)

3. SQ33 Instrucciones de
funcionamiento
3.1 Regent Preparación y volúmenes gel
Para poliacrilamida reproducibilidad y uniforme
de reticulación se recomienda desionizante,
desgasificación y filtración de soluciones de gel
de acrilamida antes de su uso. Soluciones de
acrilamida se debe almacenar en un ambiente
fresco y oscuro tal como un refrigerador y se
dejó alcanzar la temperatura ambiente antes de
verterla. Evitar la exposición al calor y la luz
del sol.
Las condiciones de polimerización debe ser
ajustada para efectuar la polimerización dentro
de alrededor de 5–10 minutos. Prueba de un
pequeño volumen en un vial antes de verter
el gel. Como una guía aproximada de 100 ml
de gel de acrilamida al 6% desgasificado
se establece en alrededor de 5 minutos a
temperatura ambiente cuando se mezclan
cuidadosamente con 450 μl de persulfato de
amonio recién preparada 10% (w/v) más 200 μl
TEMED. El tiempo de fraguado aumenta a
alrededor de 10 minutos si el volumen TEMED
se reduce a 100 μl y a aproximadamente 15
minutos con 75 μl. La cantidad de catalizadores
puede ser necesario reducir en condiciones de
calor. No vierta bajo la luz solar directa.
El secuenciador SQ33, utilizando separadores
0,35 mm de espesor, requiere aproximadamente
60 ml de solución de acrilamida.
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