Hoefer HE33 - Manual (Page 19)

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Notas, tampones, y los
volúmenes
Gel de agarosa notas electroforesis
Electroforesis en gel de agarosa se puede utilizar
para separar fragmentos de ADN tan pequeñas
como 0,1 kb o menos. Los geles de poliacrila-
mida se utilizan generalmente para los fragmen-
tos más pequeños que 1 kb.
La movilidad del ADN
Sugerida concentración de agarosa para separar
fragmentos de diferentes tamaños se dan en
la Tabla 2 a continuación. Otros factores que
afectan a los resultados de separación incluyen
el funcionamiento de amortiguación, ajuste de
tensión, temperatura, conformación, y la presen-
cia de bromuro de etidio. Agarosas especiales
están disponibles que pueden ampliar la gama de
la resolución.
Una norma común es un compendio Hind III
del fago lambda, lo que da ocho fragmentos que
varían en tamaño de 0,1 a 23 pares kb. Para una
buena resolución, correr 45 minutos a 10 cm de
largo, 1% en gel de agarosa en gel TBE 0.5X a
150 V.
Tabla 2: Las concentraciones de agarosa para
separar fragmentos de ADN de varios tamaños
alcance efectivo de la resolución
agarose (%) de los fragmentos de ADN lineal* (kb)
0,5 1,0–30
0,7 0,8–12
1,0 0,5–10
1,2 0,4–7
1,5 0,2–3
*Current Protocols in Molecular Biology, p 2.5.2 (1993)