Hoefer DQ300 - Manual (Page 24)

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4.2 Rango Lineal y enfriamiento
El rango lineal es el intervalo de concentración
en el que la lectura de la DQ300 es directamente
proporcional a la concentración del fluoróforo. El
rango lineal comienza con la menor concentración
detectable y se extiende hasta un límite superior
(concentración) que depende de las propiedades
del material fluorescente, los filtros usados, y la
longitud del camino. Vea el diagrama a continu-
ación.
Una relación no lineal se observa a altas concen-
traciones en las que la señal de fluorescencia
aumenta más lentamente que el cambio en la
concentración. A concentraciones aún más altas,
las lecturas se empiezan a disminuir a pesar
de que las concentraciones de la muestra están
aumentando. Este efecto se conoce como “temp-
lado señal”.
La linealidad se puede comprobar mediante la
dilución de una muestra de 1:1 o alguna otra
proporción conveniente (asegúrese de usar un
blanco apropiado para la dilución). Si la muestra
está dentro del rango lineal, la lectura se reducirá
en proporción directa a la dilución. Si la lectura
no disminuye en proporción directa a la dilución
o si aumenta la lectura, la muestra está fuera del
rango lineal de su fluoróforo.
TBS-380 User’s Manual 15
A nonlinear relationship is seen at higher
concentrations where the fluorescence signal
increases slower than the change in concentration.
At even higher concentrations, readings will begin
to decrease even though the sample concentrations
are increasing. This effect is known as "signal
quenching."
Linearity may be checked by diluting a sample 1:1
or some other convenient ratio (be sure to use an
appropriate blank for the dilutions). If the sample
is within the linear range, the reading will
decrease in direct proportion to the dilution. If the
reading does not decrease in direct proportion to
the dilution or if the reading increases, the sample
is beyond the linear range of your fluorophore.
4.3 Temperature Considerations
Fluorescence is temperature sensitive. As the
temperature of the sample increases, the
fluorescence decreases. For greatest accuracy,
0
1
2
3
4
5
6
7
0 2 4 6 8 10 12
Fluorophore conc.
R
el
at
iv
e
Fl
uo
re
sc
en
ce
U
ni
t
t
Unidad
de
fluorescencia
relativa
Fluoróforo concentración