Hoefer TE42 - Manual (Page 14)

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Bauen Sie die Übertragung Kassette
1
Vornässen Nitrocellulose oder Nylon-Membranen mit
destilliertem Wasser. Vornässen PVDF oder andere
hydrophobe Membranen in Methanol. Dann genießen
alle Arten Membran in Transferpuffer für 2-5 Minuten.
2
Öffnen Sie die Kassette durch die Freigabe sowohl
Latch Register an der Kante gegenüber den Scharni-
eren. Legen Sie die Kassette geöffnet in eine Schale
mit mindestens 3 cm von Transfer-Puffer gefüllt.
3
Montieren Sie den Transfer-Stack, so dass Moleküle
in Richtung der Membran wandern wird. Für negativ
geladene Makromoleküle (z. B. Nukleinsäuren und die
meisten Proteine), Aufbau der Stapel auf dem grauen
Hälfte der Kassette (und später den Deckel zu positio-
nieren, damit der graue Seitenflächen die rote Leitung
oder Anode (+).
Setzen Sie eine 3 mm dickem Schaumstoff Schwamm
auf der Kassette geöffnet getaucht und leicht
andrücken, bis die Luft ausgestoßen wird. Legen Sie
ein Blatt Löschpapier auf den Schwamm, und legen
Sie dann die Membran auf dem Löschpapier. Platz-
ieren Sie das Gel-welche enthält ein Beispiel, wurde
elektrophoretisch getrennt hat und ins Gleichgewicht
gebracht (falls erforderlich) mit Transfer-Puffer-auf der
Membran. Sanft rollen eine Glaspipette oder Reagen-
zglas über das Gel, um eingeschlossene Luft zwischen
der Membran und Gel zu vertreiben. Decken Sie
das Gel mit einem Blatt Löschpapier und legen Sie
dann einen Schwamm von der richtigen Dicke (siehe
Diagramm unten), wieder mit leichtem Druck, um
eingeschlossene Luft zu vertreiben.
Hinweis: Tragen Sie immer
Handschuhe beim Umgang mit
Membranen zu vermeiden Sie
Fingerabdrücke auf ihnen.
Wichtig! Seien Sie besonders
vorsichtig bei der Entfernung aller
Luftblasen bei jedem Schritt, weil
das Vorhandensein von Luftblasen,
vor allem zwischen der Membran
und Gel, Blöcke übertragen.